為指導(dǎo)各級(jí)醫(yī)療機(jī)構(gòu)和其他檢測(cè)機(jī)構(gòu)規(guī)范開展百日咳實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)工作，準(zhǔn)確識(shí)別百日咳確診病例，確保檢測(cè)質(zhì)量，提高檢測(cè)效率，制定本指南。

1.提取DNA。核酸檢測(cè)優(yōu)先采集鼻咽拭子，其次為鼻咽吸取液，也可使用培養(yǎng)接種后的拭子進(jìn)行核酸檢測(cè)。為提高核酸檢測(cè)陽(yáng)性率，建議單獨(dú)采樣。將拭子在無(wú)菌生理鹽水或磷酸鹽緩沖液中洗脫，離心去除上清液，沉渣提取DNA，用于核酸檢測(cè)；如不能立即提取，可—70℃保存?zhèn)溆谩?/span>

2.結(jié)果判定。國(guó)內(nèi)常用實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)檢測(cè)百日咳鮑特菌。核酸檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性，結(jié)合臨床表現(xiàn)可診斷為百日咳確診病例。陰性結(jié)果應(yīng)進(jìn)一步排除假陰性，假陰性的可能原因包括：樣本質(zhì)量差；樣本采集時(shí)間過早或過晚；樣本保存、運(yùn)輸和處理不當(dāng)；其他原因如PCR抑制等。

（三）血清學(xué)檢測(cè)。

1.適用范圍。百日咳鮑特菌血清學(xué)檢測(cè)不適用于嬰幼兒、1年內(nèi)接種含百日咳成分疫苗和既往感染的個(gè)體。

2.檢測(cè)方法和質(zhì)控。常用的血清學(xué)檢測(cè)方法是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA），以雙份血清或單份血清的PT—IgG抗體為檢測(cè)指標(biāo)。檢測(cè)試劑盒結(jié)果PT—IgG抗體濃度數(shù)據(jù)可溯源至國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)單位。每次檢測(cè)需同時(shí)檢測(cè)試劑盒提供的陰性和陽(yáng)性質(zhì)控品。

3.結(jié)果判定。對(duì)于百日咳疑似病例或臨床診斷病例，具有以下任一項(xiàng)者，可明確診斷：?jiǎn)畏菅灏偃湛弱U特菌PT—IgG抗體濃度超過診斷急性感染的標(biāo)準(zhǔn)閾值（試劑盒推薦閾值）；恢復(fù)期血清PT—IgG抗體滴（濃）度較急性期呈4倍及以上升高。

（四）全基因組測(cè)序。

全基因組測(cè)序參照國(guó)家致病菌識(shí)別網(wǎng)《細(xì)菌純培養(yǎng)物二代基因組測(cè)序操作規(guī)范》《細(xì)菌純培養(yǎng)物二代加三代基因組測(cè)序操作規(guī)范》執(zhí)行。